Consejos o pasos para correr una electroforesis
La electroforesis en gel de agarosa es una técnica fundamental para separar y analizar ADN y ARN. Conocer aspectos como la preparación del gel, la elección de la concentración de agarosa, las condiciones de migración y la tinción permite obtener resultados fiables y reproducibles en el laboratorio.
Antes de comenzar tenemos que realizarnos una serie de preguntas:
¿Qué quiero separar con la electroforesis? Como sabemos, la electroforesis es una técnica de separación, así que saber qué quiero separar es imprescindible.
¿Qué tamaño tienen las moléculas/fragmentos que quiero separar? El tamaño de las moléculas / partículas a separar es determinante a la hora de elegir la agarosa adecuada.
¿Qué queremos hacer posteriormente con las moléculas separadas en la electroforesis? El objetivo de la electroforesis puede ser solamente visualizar la separación de las moléculas/fragmentos o su recuperación para posteriores manipulaciones
¿Qué tipo de agarosa debo utilizar? El tipo de agarosa a utilizar va a venir determinado por varios factores, entre ellos la naturaleza y tamaño de la molécula que queramos separar.
Una vez que tenemos determinado lo que queremos separar, su tamaño y que agarosa debemos utilizar, tenemos que fijar los parámetros de la electroforesis:
- Concentración del gel
- Buffer que debemos utilizar
- Condiciones propias de la electroforesis como son tiempo y voltaje
